Autologiniai trombocitų koncentratai šiuo metu skirstomi į dvi klases: “pirmos kartos”, išskiriamus iš veninio, su antikoaguliantu sumaišyto kraujo, tai skystos, autologinės, trombocitais ir leukocitais praturtintos plazmos ląstelinės suspensijos. Šioje plazmos frakcijoje trombocitų ir jų veikliųjų medžiagų koncentracija kelis ar keliolika kartų viršija įprastinį jų kiekį kraujyje. Pažymėtina, jog autologinė trombocitais praturtinta plazma (ATPP) yra sudaryta ne tik iš trombocitų, joje būna ir baltųjų kraujo kūnelių – limfocitų, neutrofilų, monocitų ir makrofagų. Neutrofilai sudaro 50 – 70% baltųjų kraujo kūnelių, viena iš svarbiausių jų funkcijų – antimikrobinė, tai ląsteliniai “sanitarai”, veikia fagocitiškai, izoliuodami bakterijas. Regeneracinės trombocitų ir baltųjų kraujo kūnelių savybės atsiskleidžia po jų aktyvacijos – prasidėjus kraujo krešėjimui. ATPP ruošiama su antikoaguliantu (kraujo krešėjimą slopinančiu preparatu), todėl gydomosios savybės išsilaiko apie 8 valandas. Autologinė trombocitais praturtinta plazma gali būti aktyvuojama dirbtinai, aseptinėmis sąlygomis “in vitro” – mechanine trauma, autologiniu trombinu, kalcio preparatais arba natūraliai “in vivo” – suleidžiant ją į patologiškai pakenktus audinius ar jų aplinką, aktyvatoriumi šiuo atveju būna I-o tipo kolagenas, kurio gausu odoje, jungiamajame audinyje. Po aktyvacijos per pirmąsias 10 minučių, trombocituose įvyksta “degranuliacija” ir per valandą išsiskiria 95% augimo faktorių ir daugiau kaip 300 baltymų.
Autologinių trombocitų koncentratų (ATK) išskyrimui, iš su antikoaguliantu sumaišyto veninio kraujo, pasiūlyta daugybė, vienos ar dviejų pakopų, kraujo centrifugavimo metodikų, procedūrų trukmei svyruojant nuo 3 iki 20 min., o gravitacinei jėgai 160 – 3000 g ribose, gaunamos skystos ląstelinės suspensijos – tai “pirmos kartos” autologinės trombocitais praturtintos plazmos (ATPP) produktai. Tyrėjų dėmesys buvo sutelktas į ATPP augimo faktorius, pastariesiems priskiriant svarbiausią vaidmenį regeneracijos procesuose. Dauguma autorių ignoravo gaunamų trombocitų koncentratų kiekybinius ir kokybinius parametrus, ląstelinės sudėties ypatumus.
Autologinių trombocitų koncentratų (ATK) gamybą standartizuoti ėmėsi biotechnologinės kompanijos, sukūrusioms komercinius ATK išskyrimo rinkinius. 1999 m. Biotechnologijų institutas ( BTI, Vitoria, Spain) paskelbė apie tokio rinkinio sukūrimą (1-4), kuris tapo prototipu daugeliui vėliau pasirodžiusių autologinių trombocitų koncentratų išskyrimo sistemų, kurios buvo ir tebėra nuolat tobulinamos.
2001 m. J. Choukroun ir bendraautoriai pasiūlė “antros kartos” autologinių trombocitų koncentratų išskyrimo metodą (1, 5-11): veninis kraujas nėra maišomas su antikoaguliantu, o nedelsiant centrifuguojamas, išskiriant autologinį trombocitais praturtintą fibriną (ATPF), kuris yra natūraliai aktyvuotas, žele konsistencijos krešulys (1, 12-17) o ne skysta ląstelinė suspensija, kaip autologinė trombocitais praturtinta plazma (ATPP). Tolimesni ATPF tyrimai atskleidė autologinių trombocitų koncentratų fibrino matricos ir leukocitų terapinę ir imunologinę reikšmę (1, 18-20), padėjo giliau suprasti audinių regeneracijos procesus. Trombocitų koncentratų klasifikaciją pateikiame Paveiksle 1, skirstomaisiais kriterijais yra trombocitų koncentratų aktyvacija bei leukocitų kiekis (1, 21-27) .
Paveikslas 1
Literatūra:
1. Dohan Ehrenfest DM, Bielecki T, Mishra A, Borzini P, Inchingolo F, Sammartino G, Rasmusson L, Evert PA. In search of a consensus terminology in the field of platelet concentrates for surgical use: platelet-rich plasma (PRP), platelet-rich fibrin (PRF), fibrin gel polymerization and leukocytes. Curr Pharm Biotechnol. 2012 Jun;13(7):1131-7
2. Anitua, E. Plasma rich in growth factors: preliminary results of use in the preparation of future sites for implants. Int. J. Oral Maxillofac. Implants, 1999, 14(4), 529-535
3. Anitua, E.; Sanchez, M.; Orive, G.; Andia, I. The potential impact of the preparation rich in growth factors (PRGF) in different medi cal fields. Biomaterials, 2007, 28(31), 4551-4560
4. Weibrich, G.; Kleis, W.K.; Hitzler, W.E.; Hafner, G. Comparison of the platelet concentrate collection system with the plasma-rich- in-growth-factors kit to produce platelet-rich plasma: a technical report. Int. J. Oral Maxillofac. Implants, 2005, 20(1), 118-123
5. Choukroun, J.; Adda, F.; Schoeffler, C.; Vervelle, A. Une opportunite en paro-implantologie: le PRF. Implantodontie, 2001, 42,55-62
6. Young, J. G., and Medawar, E. D.Fibrin suture of pe- ripheral nerves: Measurement of the rate of regeneration. Lancet 2: 126, 1940
7. Sunitha Raja, V.; Munirathnam Naidu, E. Platelet-rich fibrin: evolution of a second-generation platelet concentrate. Indian J. Dent. Res., 2008, 19(1), 42-46
8. Dohan, D.M.; Choukroun, J.; Diss, A.; Dohan, S.L.; Dohan A.J.; Mouhyi, J.; Gogly, B. Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part ІІ: platelet-related biologic features. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2006, 101(3), e45-50
9. Dohan, D.M.; Choukroun, J.; Diss, A.; Dohan, S.L.; Dohan A.J.; Mouhyi, J.; Gogly, B. Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part ІІІ: leucocyte activation: a new feature for platelet concentrates? Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2006, 101(3), e51-55
10. Choukround, J.; Diss, A.; Simonpieri, A.; Girard, M.O.; Schoeffler, C.; Dohan, S.L.; Dohan A.J.; Mouhyi, J.; Dohan D.M.. Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part ІV: clinical effects on tissue healing. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2006, 101(3), e56-60
11. Choukround, J.; Diss, A.; Simonpieri, A.; Girard, M.O.; Schoeffler, C.; Dohan, S.L.; Dohan A.J.; Mouhyi, J.; Dohan D.M.. Platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part V: histologic evaluation of PRF effects on bone allograft maturation in sinus lift. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2006, 101(3), 299-303
12. Mazor, Z.; Horowitz, R.A.; Del Corso, M.; Prasad, H.S.; Rohrer, M.D.; Dohan Ehrenfest, D.M. Sinus floor augmentation with simultaneous implant placement using Choukroun’s platelet-rich fibrin as the sole grafting material: a radiologic and histologic study at 6 months. J. Periodontol., 2009, 80 (12), 2056-2064
13. Del Corso, M.; Sammartino, G.; Dohan Ehrenfest, D.M. Re: "Clinical evaluation of a modified coronally advanced flap alone or in combination with a platelet-rich fibrin membrane for the treatment of adjacent multiple gingival recessions: a 6-month study". J. Periodontal., 2009, 80(11), 1694-1697: author reply 1697-1699
14. Dohan Ehrenfest, D.M.; Lemo, N.; Jimbo. R.; Sammartino, G. Selecting a relevant animal model for testing the in vivo effects of Choukroun's Platelet-Rich Fibrin (PRF): rabbit tricks and traps. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2010, 10(4), 413-416
15. Simonpieri, A.; Choukroun, J.; Del Corso, M.; Sammartino, G.; Dohan Ehrenfest, D.M. Simultaneous sinus-lift and implantation using microthreaded implants and leukocyte and platelet-rich fibrin as sole grafting material: a six-year experience. Implant Dent., 2011,20(1), 2-12.
16. Dohan Ehrenfest, D.M.; Del Corso, M.; Diss, A.; Mouhyi, J.; Charrier, J.B. Three-Dimensional Architecture and Cell Composition of a Choukroun's Platelet-Rich Fibrin Clot and Membrane. J. Periodontal., 2010, 81(4), 546-555
17. Dohan Ehrenfest, D.M. How to optimize the preparation of Leukocyte- and Platelet-Rich Fibrin (L-PRF, Choukroun's technique) clots and membranes: introducing the PRF Box. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2010,110(3), 275-278
18. Dohan Ehrenfest, D.M.; dc Peppo, G.M.; Doglioli, P.; Sammart G. Slow release of growth factors and thrombospondin-1 Choukroun's platelet-rich fibrin (PRF): a gold standard to ach: for all surgical platelet concentrates technologies. Growth Fact 2009,27(1), 63-69
19. Dohan Ehrenfest, D.M.; Diss, A.; Odin, G.; Doglioli, P.; Hippol M.P.; Charrier, J.B. In vitro effects of Choukroun's PRF (plati rich fibrin) on human gingival fibroblasts, dermal prckcratinocj preadipocytes, and maxillofacial osteoblasts in primary culti Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 21 108(3), 341-352
20. Dohan Ehrenfest, D.M.; Doglioli, P.; de Peppo, G.M.; Del Co M.; Charrier, J.B. Choukroun's platelet-rich fibrin (PRF) stimul in vitro proliferation and differentiation of human oral bone me chymal stem cell in a dose-dependent way. Arch. Oral Biol., 2( 55(3), 185-194
21. Young, J. G., and Medawar, E. D. Fibrin suture of pe- ripheral nerves: Measurement of the rate of regener ation. Lancet 2: 126, 1940
22. Tidrick, R. T., and Warner, E. D. Fibrin fixation of skin transplants. Surgery 15: 90, 1944
23. Gassling, V.L.; Acil, Y.; Springer, I.N.; Hubert, N.; Wiltfang Platelet-rich plasma and platelet-rich fibrin in human cell cult Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., (2) 108, 48-55
24. Dohan Ehrcnfest, D.M.; Del Corso, M.; Inchingolo, F.; Samn tino, G.; Charrier, J.B. Platelet-Rich Plasma (PRP) and Plate Rich Fibrin (PRF) in human cell cultures: growth factor release contradictory results. Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral diol. Endod., 2010,110(4), 418-421
25. He, L.; Lin, Y.; Hu, X.; Zhang, Y.; Wu, H. A comparative stud platelet-rich fibrin (PRF) and platelet-rich plasma (PRP) on the feet of proliferation and differentiation of rat osteoblasts in v, Oral Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2 108(5), 707-713.
26. Dohan Ehrenfest, D.M.; Del Corso, M.; Inchingolo, F.; Chan J.B. Selecting a relevant in vitro cell model for testing and com ing the effects of a Choukroun's Platelet-Rich Fibrin (PRF) rn brane and a Platelet-Rich Plasma (PRP) gel: tricks and traps. ( Surg. Oral Med. Oral Pathol. Oral Radiol. Endod., 2010, lit 409-411
27. Dohan Ehrenfest, D.M.; Bielecki, T.; Del Corso, M.; Inchingolo, [49] F.; Sammartino, G. Shedding light in the controversial terminology for platelet-rich products: Platelet-Rich Plasma (PRP), Platelet- Rich Fibrin (PRF), Platelet-Leukocyte Gel (PLG), Preparation Rich in Growth Factors (PRGF), classification and commercialism. J. Biomed. Mater. Res. A, 2010, P5(4), 1280-1282